在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記，買前要和技術(shù)人員詳細(xì)溝通，有些產(chǎn)品分類很細(xì)，同一個(gè)項(xiàng)目會(huì)有幾個(gè)試劑盒。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保存其免疫學(xué)活性，又保存酶的活性。關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系，大致上比例是1毫升全血可以得到500ul血清或血漿。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。需要的樣本量取決于你的檢測項(xiàng)目，有些檢測項(xiàng)目需要血清做1:100稀釋，甚至是更高的稀釋度，那么幾微升血樣就夠了，有些項(xiàng)目只能做較低的稀釋，甚至不稀釋，這樣的話每孔會(huì)需要100 ul 左右。購買ELISA試劑盒首先要注意有效期，盡量買剛出廠不久的。大家更多的了解試劑盒無非就是擔(dān)心實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒Γ噭┖薪Y(jié)果出以后如何解釋。只要是商品化試劑盒，都是比較穩(wěn)定的，但是ELISA試劑盒一般檢測抗原不如檢測抗體準(zhǔn)確度高。
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